熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中的空白對(duì)照

無(wú)模板空白對(duì)照

NTC是指不含有模板（陽(yáng)性模板或者陰性模板）的對(duì)照。目前的試劑盒的NC一般都是水或陰性緩沖液，所以NC等同于NTC。其實(shí)兩者有不同的作用。

儀器空白對(duì)照

NTC是含有引物探針和反應(yīng)液主要監(jiān)控引物探針，反應(yīng)體系有沒有被污染。這里的儀器空白對(duì)照我通常使用的是空反應(yīng)管來(lái)監(jiān)控儀器有無(wú)非特異性的熒光信號(hào)。

熒光染料對(duì)照

最常使用的是ROX染料，由于熒光定量PCR的熒光信號(hào)在每個(gè)樣品孔會(huì)有微小的差異所以使用特定的ROX熒光染料，系統(tǒng)可以根據(jù)ROX熒光染料的信號(hào)值來(lái)校準(zhǔn)每孔的熒光信號(hào)。